فطرت ڈاٹ کام پر جانے کا شکریہ۔ آپ جس براؤزر کا ورژن استعمال کر رہے ہیں اسے محدود CSS سپورٹ حاصل ہے۔ بہترین تجربے کے لیے، ہم تجویز کرتے ہیں کہ براؤزر کا تازہ ترین ورژن استعمال کریں (یا انٹرنیٹ ایکسپلورر میں مطابقت موڈ کو آف کریں)۔ مزید برآں، مسلسل سپورٹ کو یقینی بنانے کے لیے، اس سائٹ میں اسٹائل یا جاوا اسکرپٹ شامل نہیں ہوگا۔
ہائیڈروجن سلفائیڈ (H2S) کے انسانی جسم پر متعدد جسمانی اور پیتھولوجیکل اثرات ہوتے ہیں۔ Sodium hydrosulfide (NaHS) کو حیاتیاتی تجربات میں H2S کے اثرات کا جائزہ لینے کے لیے فارماسولوجیکل ٹول کے طور پر بڑے پیمانے پر استعمال کیا جاتا ہے۔ اگرچہ NaHS حل سے H2S کے نقصان میں صرف چند منٹ لگتے ہیں، بعض جانوروں کے مطالعے میں NaHS حل کو پینے کے پانی میں H2S کے لیے ڈونر مرکبات کے طور پر استعمال کیا گیا ہے۔ اس تحقیق میں تحقیق کی گئی کہ آیا چوہے/چوہے کی بوتلوں میں تیار کردہ 30 μM کی NaHS حراستی کے ساتھ پینے کا پانی کم از کم 12-24 گھنٹے تک مستحکم رہ سکتا ہے، جیسا کہ کچھ مصنفین نے تجویز کیا ہے۔ پینے کے پانی میں NaHS (30 μM) کا محلول تیار کریں اور اسے فوری طور پر چوہے/چوہے کی پانی کی بوتلوں میں ڈال دیں۔ میتھیلین بلیو طریقہ استعمال کرتے ہوئے سلفائیڈ کے مواد کی پیمائش کرنے کے لیے 0، 1، 2، 3، 4، 5، 6، 12 اور 24 گھنٹے میں پانی کی بوتل کے نوک اور اندر سے نمونے جمع کیے گئے۔ اس کے علاوہ، نر اور مادہ چوہوں کو دو ہفتوں کے لیے NaHS (30 μM) کے ساتھ انجکشن لگایا گیا اور پہلے ہفتے کے دوران اور دوسرے ہفتے کے آخر میں ہر دوسرے دن سیرم سلفائیڈ کی تعداد کی پیمائش کی گئی۔ پانی کی بوتل کی نوک سے حاصل کردہ نمونے میں NaHS حل غیر مستحکم تھا۔ اس میں 12 اور 24 گھنٹے کے بعد بالترتیب 72% اور 75% کمی واقع ہوئی۔ پانی کی بوتلوں کے اندر سے حاصل کیے گئے نمونوں میں، 2 گھنٹے کے اندر NaHS میں کمی نمایاں نہیں تھی۔ تاہم، اس میں 12 اور 24 گھنٹے کے بعد بالترتیب 47% اور 72% کمی واقع ہوئی۔ NaHS انجیکشن نے نر اور مادہ چوہوں کے سیرم سلفائیڈ کی سطح کو متاثر نہیں کیا۔ آخر میں، پینے کے پانی سے تیار کردہ NaHS حل کو H2S عطیہ کے لیے استعمال نہیں کیا جانا چاہیے کیونکہ حل غیر مستحکم ہے۔ انتظامیہ کا یہ راستہ جانوروں کو بے قاعدہ اور توقع سے کم مقدار میں NaHS کا سامنا کرے گا۔
ہائیڈروجن سلفائیڈ (H2S) کو 1700 سے زہریلے کے طور پر استعمال کیا جا رہا ہے۔ تاہم، ایک endogenous biosignaling molecule کے طور پر اس کے ممکنہ کردار کو 1996 میں Abe اور Kimura نے بیان کیا تھا۔ پچھلی تین دہائیوں کے دوران مختلف انسانی نظاموں میں H2S کے متعدد افعال کو واضح کیا گیا ہے، جس سے یہ احساس ہوا کہ H2S عطیہ کرنے والے مالیکیول بعض بیماریوں کے علاج یا انتظام میں طبی استعمال کر سکتے ہیں۔ Chirino et al دیکھیں۔ ایک حالیہ جائزہ کے لیے۔
Sodium hydrosulfide (NaHS) کو بہت سے سیل کلچر اور جانوروں کے مطالعے میں H2S کے اثرات کا اندازہ لگانے کے لیے فارماسولوجیکل ٹول کے طور پر بڑے پیمانے پر استعمال کیا گیا ہے5,6,7,8۔ تاہم، NaHS ایک مثالی H2S ڈونر نہیں ہے کیونکہ یہ تیزی سے H2S/HS- حل میں تبدیل ہو جاتا ہے، پولی سلفائیڈز سے آسانی سے آلودہ ہوتا ہے، اور آسانی سے آکسائڈائز اور اتار چڑھاؤ کا شکار ہو جاتا ہے۔ بہت سے حیاتیاتی تجربات میں، NaHS پانی میں تحلیل ہو جاتا ہے، جس کے نتیجے میں غیر فعال اتار چڑھاؤ اور H2S10,11,12 کا نقصان، H2S11,12,13 کا اچانک آکسیکرن، اور photolysis14 ہوتا ہے۔ H2S11 کے اتار چڑھاؤ کی وجہ سے اصل محلول میں سلفائیڈ بہت تیزی سے ضائع ہو جاتی ہے۔ ایک کھلے کنٹینر میں، H2S کی نصف زندگی (t1/2) تقریباً 5 منٹ ہے، اور اس کا ارتکاز تقریباً 13% فی منٹ تک کم ہو جاتا ہے۔ اگرچہ NaHS محلولوں سے ہائیڈروجن سلفائیڈ کے ضائع ہونے میں صرف چند منٹ لگتے ہیں، کچھ جانوروں کے مطالعے نے NaHS محلول کو پینے کے پانی میں ہائیڈروجن سلفائیڈ کے ذریعہ کے طور پر 1-21 ہفتوں تک استعمال کیا ہے، ہر 12-24 گھنٹے میں NaHS پر مشتمل محلول کی جگہ لے لیتا ہے۔ سائنسی تحقیق کے اصولوں سے مطابقت رکھتا ہے، کیونکہ دوائیوں کی خوراک دیگر پرجاتیوں، خاص طور پر انسانوں میں ان کے استعمال پر مبنی ہونی چاہیے۔
بائیو میڈیسن میں پری کلینیکل تحقیق کا مقصد مریضوں کی دیکھ بھال یا علاج کے نتائج کے معیار کو بہتر بنانا ہے۔ تاہم، زیادہ تر جانوروں کے مطالعہ کے نتائج ابھی تک انسانوں میں ترجمہ نہیں کیے گئے ہیں 28,29,30. اس ترجمے کی ناکامی کی ایک وجہ جانوروں کے مطالعے کے طریقہ کار کے معیار پر توجہ نہ دینا ہے۔ لہذا، اس مطالعے کا مقصد یہ تحقیق کرنا تھا کہ آیا چوہے/چوہے کی پانی کی بوتلوں میں تیار کردہ 30 μM NaHS حل پینے کے پانی میں 12-24 گھنٹے تک مستحکم رہ سکتے ہیں، جیسا کہ کچھ مطالعات میں دعویٰ یا تجویز کیا گیا ہے۔
اس تحقیق کے تمام تجربات ایران میں لیبارٹری جانوروں کی دیکھ بھال اور استعمال کے لیے شائع شدہ رہنما خطوط کے مطابق کیے گئے۔ اس مطالعہ میں تمام تجرباتی رپورٹس بھی ARRIVE کے رہنما خطوط پر عمل پیرا ہیں۔ شاہد بہشتی یونیورسٹی آف میڈیکل سائنسز کے انسٹی ٹیوٹ آف اینڈوکرائن سائنسز کی اخلاقیات کمیٹی نے اس مطالعے میں تمام تجرباتی طریقہ کار کی منظوری دی۔
Zinc acetate dihydrate (CAS: 5970-45-6) اور anhydrous ferric chloride (CAS: 7705-08-0) Biochem، Chemopahrama (Cosne-sur-Loire، France) سے خریدے گئے تھے۔ سوڈیم ہائیڈرو سلفائیڈ ہائیڈریٹ (CAS: 207683-19-0) اور N,N-dimethyl-p-phenylenediamine (DMPD) (CAS: 535-47-0) Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA) سے خریدے گئے تھے۔ Isoflurane پیرمل (بیت لحم، PA، USA) سے خریدا گیا تھا۔ ہائیڈروکلورک ایسڈ (HCl) مرک (Darmstadt، جرمنی) سے خریدا گیا تھا۔
پینے کے پانی میں NaHS (30 μM) کا محلول تیار کریں اور اسے فوراً چوہے/چوہے کے پانی کی بوتلوں میں ڈال دیں۔ اس ارتکاز کا انتخاب متعدد اشاعتوں کی بنیاد پر کیا گیا تھا جو NaHS کو H2S کے ذریعہ کے طور پر استعمال کرتے ہیں۔ بحث سیکشن دیکھیں۔ NaHS ایک ہائیڈریٹڈ مالیکیول ہے جس میں ہائیڈریشن کے پانی کی مختلف مقدار ہو سکتی ہے (یعنی، NaHS•xH2O)؛ مینوفیکچرر کے مطابق، ہمارے مطالعے میں استعمال ہونے والے NaHS کا فیصد 70.7% تھا (یعنی، NaHS•1.3 H2O)، اور ہم نے اپنے حسابات میں اس قدر کو مدنظر رکھا، جہاں ہم نے 56.06 g/mol کا مالیکیولر وزن استعمال کیا، جو کہ anhydrous NaHS کا سالماتی وزن ہے۔ ہائیڈریشن کا پانی (جسے کرسٹلائزیشن کا پانی بھی کہا جاتا ہے) پانی کے مالیکیولز ہیں جو کرسٹل کی ساخت بناتے ہیں۔ ہائیڈریٹس میں اینہائیڈریٹس کے مقابلے میں مختلف جسمانی اور تھرموڈینامک خصوصیات ہوتی ہیں۔
پینے کے پانی میں NaHS شامل کرنے سے پہلے، سالوینٹ کے پی ایچ اور درجہ حرارت کی پیمائش کریں۔ جانوروں کے پنجرے میں چوہے/چوہے کی پانی کی بوتل میں فوری طور پر NaHS محلول ڈالیں۔ سلفائیڈ کے مواد کی پیمائش کے لیے ٹپ سے اور پانی کی بوتل کے اندر سے 0، 1، 2، 3، 4، 5، 6، 12، اور 24 گھنٹے پر نمونے جمع کیے گئے۔ سلفائیڈ کی پیمائش ہر نمونے کے فوراً بعد کی گئی۔ ہم نے ٹیوب کی نوک سے نمونے حاصل کیے کیونکہ کچھ مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ پانی کی ٹیوب کا چھوٹا تاکنا سائز H2S بخارات 15,19 کو کم کر سکتا ہے۔ یہ مسئلہ بوتل میں موجود حل پر بھی لاگو ہوتا ہے۔ تاہم، پانی کی بوتل کی گردن میں موجود محلول کے لیے ایسا نہیں تھا، جس میں بخارات کی شرح زیادہ تھی اور وہ خود آکسائڈائز کر رہا تھا۔ درحقیقت یہ پانی پہلے جانوروں نے پیا۔
مطالعہ میں نر اور مادہ وسٹار چوہوں کا استعمال کیا گیا۔ چوہوں کو معیاری حالات (درجہ حرارت 21–26 ° C، نمی 32–40٪) کے تحت پولی پروپیلین کے پنجروں میں (2–3 چوہے فی پنجرے) میں 12 گھنٹے روشنی (7 بجے سے شام 7 بجے) اور 12 گھنٹے اندھیرے (7 بجے سے صبح 7 بجے) کے ساتھ رکھا گیا تھا۔ چوہوں کو نل کے پانی تک مفت رسائی حاصل تھی اور انہیں معیاری چاؤ (خوراک ڈیم پارس کمپنی، تہران، ایران) سے کھلایا جاتا تھا۔ عمر کے مطابق (6 ماہ) خواتین (n = 10، جسمانی وزن: 190–230 g) اور مرد (n = 10، جسمانی وزن: 320–370 g) Wistar چوہوں کو تصادفی طور پر کنٹرول میں تقسیم کیا گیا تھا اور NaHS (30 μM) علاج شدہ گروپس (n = 5 فی گروپ)۔ نمونے کے سائز کا تعین کرنے کے لیے، ہم نے KISS (Keep It Simple، Stupid) کا طریقہ استعمال کیا، جو پچھلے تجربے اور طاقت کے تجزیے کو یکجا کرتا ہے۔ ہم نے پہلے 3 چوہوں پر ایک پائلٹ مطالعہ کیا اور اوسط سیرم کل سلفائیڈ کی سطح اور معیاری انحراف (8.1 ± 0.81 μM) کا تعین کیا۔ اس کے بعد، 80% پاور پر غور کرتے ہوئے اور دو طرفہ 5% اہمیت کی سطح کو فرض کرتے ہوئے، ہم نے ایک ابتدائی نمونہ کا سائز (n = 5 سابقہ ​​لٹریچر کی بنیاد پر) کا تعین کیا جو تجرباتی جانوروں کے نمونے کے سائز کا حساب لگانے کے لیے Festing کی تجویز کردہ پیش وضاحتی قدر کے ساتھ 2.02 کے معیاری اثر سائز کے مساوی تھا۔ اس قدر کو SD (2.02 × 0.81) سے ضرب کرنے کے بعد، پیش گوئی شدہ قابل شناخت اثر سائز (1.6 μM) 20% تھا، جو قابل قبول ہے۔ اس کا مطلب ہے کہ n = 5/گروپ گروپوں کے درمیان 20٪ اوسط تبدیلی کا پتہ لگانے کے لیے کافی ہے۔ چوہوں کو تصادفی طور پر ایکسل سافٹ ویئر 36 (ضمنی شکل 1) کے بے ترتیب فنکشن کا استعمال کرتے ہوئے کنٹرول اور NaSH-علاج شدہ گروپوں میں تقسیم کیا گیا تھا۔ بلائنڈنگ نتائج کی سطح پر کی گئی تھی، اور بائیو کیمیکل پیمائش کرنے والے تفتیش کار گروپ اسائنمنٹس سے واقف نہیں تھے۔
دونوں جنسوں کے NaHS گروپوں کا علاج پینے کے پانی میں 2 ہفتوں کے لیے تیار کردہ 30 μM NaHS محلول سے کیا گیا۔ تازہ محلول ہر 24 گھنٹے میں فراہم کیا جاتا تھا، اس دوران جسم کا وزن ناپا جاتا تھا۔ پہلے اور دوسرے ہفتوں کے اختتام پر ہر دوسرے دن isoflurane اینستھیزیا کے تحت تمام چوہوں کی دم کے اشارے سے خون کے نمونے جمع کیے گئے تھے۔ خون کے نمونوں کو 10 منٹ کے لیے 3000 گرام پر سینٹرفیوج کیا گیا، سیرم کو الگ کیا گیا اور بعد میں سیرم یوریا، کریٹینائن (Cr) اور کل سلفائیڈ کی پیمائش کے لیے -80 ° C پر محفوظ کیا گیا۔ سیرم یوریا کا تعین انزیمیٹک یوریس طریقہ سے کیا گیا تھا، اور سیرم کریٹینائن کا تعین تجارتی طور پر دستیاب کٹس (مین کمپنی، تہران، ایران) اور ایک خودکار تجزیہ کار (سلیکٹرا ای، سیریل نمبر 0-2124، نیدرلینڈز) کا استعمال کرتے ہوئے فوٹوومیٹرک جاف طریقہ سے کیا گیا تھا۔ یوریا اور CR کے لیے انٹرا اور انٹراسے گتانک 2.5% سے کم تھے۔
میتھیلین بلیو (MB) طریقہ پینے کے پانی اور NaHS پر مشتمل سیرم میں کل سلفائیڈ کی پیمائش کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔ بلک محلول اور حیاتیاتی نمونے11,37 میں سلفائیڈ کی پیمائش کے لیے MB سب سے زیادہ استعمال ہونے والا طریقہ ہے۔ MB طریقہ کل سلفائیڈ پول38 کا تخمینہ لگانے اور پانی کے مرحلے39 میں H2S، HS- اور S2 کی شکل میں غیر نامیاتی سلفائیڈ کی پیمائش کرنے کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے۔ اس طریقہ کار میں، زنک ایسیٹیٹ 11,38 کی موجودگی میں سلفر کو زنک سلفائیڈ (ZnS) کے طور پر تیار کیا جاتا ہے۔ زنک ایسیٹیٹ ورن سلفائڈز کو دوسرے کروموفورس سے الگ کرنے کے لیے سب سے زیادہ استعمال ہونے والا طریقہ ہے۔ ZnS کو سخت تیزابیت والے حالات میں HCl11 کا استعمال کرتے ہوئے دوبارہ تحلیل کیا گیا۔ سلفائیڈ DMPD کے ساتھ 1:2 کے اسٹوچیومیٹرک تناسب میں رد عمل میں فیرک کلورائد (Fe3+ ایک آکسیڈائزنگ ایجنٹ کے طور پر کام کرتا ہے) کے ذریعے ڈائی MB بنانے کے لیے رد عمل ظاہر کرتا ہے، جس کا پتہ 670 nm40,41 پر سپیکٹرو فوٹومیٹرک طور پر پایا جاتا ہے۔ MB طریقہ کا پتہ لگانے کی حد تقریباً 1 μM11 ہے۔
اس مطالعہ میں، ہر نمونے کا 100 μL (حل یا سیرم) ایک ٹیوب میں شامل کیا گیا تھا۔ پھر 200 μL زنک ایسیٹیٹ (آست پانی میں 1% w/v)، 100 μL DMPD (7.2 M HCl میں 20 mM)، اور FeCl3 کا 133 μL (1.2 M HCl میں 30 mM) شامل کیا گیا۔ مرکب کو 30 منٹ کے لئے اندھیرے میں 37 ° C پر انکیوبیٹ کیا گیا تھا۔ محلول کو 10 منٹ کے لیے 10،000 جی پر سینٹرفیوج کیا گیا تھا، اور مائکروپلیٹ ریڈر (BioTek، MQX2000R2، Winooski، VT، USA) کا استعمال کرتے ہوئے سپرنٹنٹ کے جذب کو 670 nm پر پڑھا گیا تھا۔ ddH2O (ضمنی شکل 2) میں NaHS (0–100 μM) کے انشانکن وکر کا استعمال کرتے ہوئے سلفائیڈ کی تعداد کا تعین کیا گیا تھا۔ پیمائش کے لیے استعمال ہونے والے تمام حل تازہ تیار کیے گئے تھے۔ سلفائیڈ کی پیمائش کے لیے فرق کے انٹرا اور انٹراسسے گتانک بالترتیب 2.8% اور 3.4% تھے۔ ہم نے سوڈیم تھیو سلفیٹ پر مشتمل پینے کے پانی اور سیرم کے نمونوں سے فورٹیفائیڈ نمونہ طریقہ42 کا استعمال کرتے ہوئے کل سلفائیڈ کا بھی تعین کیا۔ سوڈیم تھیو سلفیٹ پر مشتمل پینے کے پانی اور سیرم کے نمونوں کی بازیافت بالترتیب 91 ± 1.1٪ (n = 6) اور 93 ± 2.4٪ (n = 6) تھی۔
اعداد و شمار کا تجزیہ ونڈوز کے لیے گراف پیڈ پرزم سافٹ ویئر ورژن 8.0.2 (گراف پیڈ سافٹ ویئر، سان ڈیاگو، CA، USA، www.graphpad.com) کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا۔ NaHS کے اضافے سے پہلے اور بعد میں پینے کے پانی کے درجہ حرارت اور pH کا موازنہ کرنے کے لیے ایک جوڑا ٹی ٹیسٹ استعمال کیا گیا تھا۔ NaHS پر مشتمل حل میں H2S کے نقصان کو بیس لائن اپٹیک سے فیصد کمی کے طور پر شمار کیا گیا تھا، اور اس بات کا اندازہ لگانے کے لیے کہ آیا نقصان شماریاتی لحاظ سے اہم تھا، ہم نے ایک طرفہ بار بار کیے جانے والے ANOVA کو انجام دیا جس کے بعد Dunnett کا متعدد موازنہ ٹیسٹ ہوا۔ جسمانی وزن، سیرم یوریا، سیرم کریٹینائن، اور وقت کے ساتھ کل سیرم سلفائیڈ کا موازنہ مختلف جنسوں کے کنٹرول اور NaHS سے علاج شدہ چوہوں کے درمیان دو طرفہ مکسڈ (درمیان کے اندر) انووا کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا جس کے بعد بونفیرونی پوسٹ ہاک ٹیسٹ کیا گیا۔ دو دم والی P اقدار <0.05 کو شماریاتی لحاظ سے اہم سمجھا جاتا تھا۔
پینے کے پانی کا پی ایچ NaHS کے اضافے سے پہلے 7.60 ± 0.01 اور NaHS کے اضافے کے بعد 7.71 ± 0.03 تھا (n = 13، p = 0.0029)۔ پینے کے پانی کا درجہ حرارت 26.5 ± 0.2 تھا اور NaHS کے اضافے کے بعد 26.2 ± 0.2 تک کم ہو گیا (n = 13، p = 0.0128)۔ پینے کے پانی میں 30 μM NaHS محلول تیار کریں اور اسے پانی کی بوتل میں محفوظ کریں۔ NaHS حل غیر مستحکم ہے اور وقت کے ساتھ اس کا ارتکاز کم ہوتا جاتا ہے۔ پانی کی بوتل کی گردن سے نمونے لینے پر، پہلے گھنٹے کے اندر نمایاں کمی (68.0%) دیکھی گئی، اور محلول میں NaHS مواد میں 12 اور 24 گھنٹے کے بعد بالترتیب 72% اور 75% کی کمی واقع ہوئی۔ پانی کی بوتلوں سے حاصل کیے گئے نمونوں میں، NaHS میں 2 گھنٹے تک کمی نمایاں نہیں تھی، لیکن 12 اور 24 گھنٹوں کے بعد اس میں بالترتیب 47 فیصد اور 72 فیصد کمی واقع ہوئی تھی۔ یہ اعداد و شمار بتاتے ہیں کہ پینے کے پانی میں تیار کردہ 30 μM محلول میں NaHS کا فیصد 24 گھنٹے کے بعد ابتدائی قدر کے تقریباً ایک چوتھائی رہ گیا تھا، نمونے لینے کے مقام سے قطع نظر (شکل 1)۔
چوہے/چوہے کی بوتلوں میں پینے کے پانی میں NaHS محلول (30 μM) کا استحکام۔ حل کی تیاری کے بعد، پانی کی بوتل کے سرے اور اندرونی حصے سے نمونے لیے گئے۔ ڈیٹا کو اوسط ± SD (n = 6/گروپ) کے طور پر پیش کیا جاتا ہے۔ * اور #، P <0.05 وقت کے مقابلے میں 0۔ پانی کی بوتل کی تصویر میں بوتل کی نوک (کھولنے کے ساتھ) اور جسم کو دکھایا گیا ہے۔ ٹپ کا حجم تقریباً 740 μL ہے۔
تازہ تیار کردہ 30 μM حل میں NaHS کا ارتکاز 30.3 ± 0.4 μM (حد: 28.7–31.9 μM، n = 12) تھا۔ تاہم، 24 گھنٹے کے بعد، NaHS کا ارتکاز کم ہو کر کم ہو گیا (مطلب: 3.0 ± 0.6 μM)۔ جیسا کہ شکل 2 میں دکھایا گیا ہے، NaHS کی ارتکاز جس میں چوہوں کو بے نقاب کیا گیا تھا مطالعہ کی مدت کے دوران مستقل نہیں تھا۔
مادہ چوہوں کے جسمانی وزن میں وقت کے ساتھ نمایاں اضافہ ہوا (کنٹرول گروپ میں 205.2 ± 5.2 g سے 213.8 ± 7.0 g تک اور NaHS سے علاج شدہ گروپ میں 204.0 ± 8.6 g سے 211.8 ± 7.5 g تک)؛ تاہم، NaHS علاج کا جسمانی وزن پر کوئی اثر نہیں ہوا (تصویر 3)۔ نر چوہوں کے جسمانی وزن میں وقت کے ساتھ نمایاں اضافہ ہوا (کنٹرول گروپ میں 338.6 ± 8.3 g سے 352.4 ± 6.0 g تک اور NaHS سے علاج شدہ گروپ میں 352.4 ± 5.9 g سے 363.2 ± 4.3 g تک)؛ تاہم، NaHS علاج کا جسمانی وزن پر کوئی اثر نہیں ہوا (تصویر 3)۔
NaHS (30 μM) کی انتظامیہ کے بعد مادہ اور نر چوہوں میں جسمانی وزن میں تبدیلی۔ ڈیٹا کو اوسط ± SEM کے طور پر پیش کیا گیا ہے اور بونفرونی پوسٹ ہاک ٹیسٹ کے ساتھ تغیر کے دو طرفہ مخلوط (درمیان کے اندر) تجزیہ کا استعمال کرتے ہوئے موازنہ کیا گیا ہے۔ n = ہر گروپ میں ہر جنس کا 5۔
سیرم یوریا اور کریٹائن فاسفیٹ کی تعداد پورے مطالعہ میں کنٹرول اور NaSH سے علاج شدہ چوہوں میں موازنہ تھی۔ مزید برآں، NaSH کے علاج نے سیرم یوریا اور کریٹین کروم کی تعداد کو متاثر نہیں کیا (ٹیبل 1)۔
بیس لائن سیرم کی کل سلفائیڈ کی تعداد کا موازنہ کنٹرول اور NaHS سے علاج شدہ مرد (8.1 ± 0.5 μM بمقابلہ 9.3 ± 0.2 μM) اور خواتین (9.1 ± 1.0 μM بمقابلہ 6.1 ± 1.1 μM) چوہوں کے درمیان تھا۔ 14 دن تک NaHS انتظامیہ کا نر یا مادہ چوہوں میں سیرم کل سلفائیڈ کی سطح پر کوئی اثر نہیں ہوا (تصویر 4)۔
NaHS (30 μM) کی انتظامیہ کے بعد نر اور مادہ چوہوں میں سیرم کی کل سلفائیڈ کی تعداد میں تبدیلی۔ ڈیٹا کو اوسط ± SEM کے طور پر پیش کیا گیا ہے اور بونفرونی پوسٹ ہاک ٹیسٹ کے ساتھ تغیر کے دو طرفہ مخلوط (اندر کے اندر) تجزیہ کا استعمال کرتے ہوئے موازنہ کیا گیا ہے۔ ہر جنس، n = 5/گروپ۔
اس تحقیق کا بنیادی نتیجہ یہ ہے کہ پینے کا پانی جس میں NaHS ہوتا ہے غیر مستحکم ہوتا ہے: ابتدائی کل سلفائیڈ مواد کا صرف ایک چوتھائی حصہ چوہے/چوہے کی پانی کی بوتلوں کی نوک سے نمونے لینے کے 24 گھنٹے بعد معلوم کیا جا سکتا ہے۔ مزید برآں، NaHS محلول میں H2S کے نقصان کی وجہ سے چوہوں کو غیر مستحکم NaHS ارتکاز کا سامنا کرنا پڑا، اور NaHS کو پینے کے پانی میں شامل کرنے سے جسمانی وزن، سیرم یوریا اور کریٹائن کرومیم، یا کل سیرم سلفائیڈ پر کوئی اثر نہیں پڑا۔
اس مطالعہ میں، پینے کے پانی میں تیار کردہ 30 μM NaHS حل سے H2S کے نقصان کی شرح تقریباً 3% فی گھنٹہ تھی۔ ایک بفرڈ محلول میں (10 mM PBS میں 100 μM سوڈیم سلفائیڈ، pH 7.4)، سلفائیڈ کا ارتکاز 8 h11 کے دوران وقت کے ساتھ ساتھ 7% کم ہونے کی اطلاع ہے۔ ہم نے پہلے یہ اطلاع دے کر NaHS کی انٹراپریٹونیئل انتظامیہ کا دفاع کیا ہے کہ پینے کے پانی میں 54 μM NaHS محلول سے سلفائیڈ کے نقصان کی شرح تقریباً 2.3% فی گھنٹہ تھی (پہلے 12 گھنٹے میں 4%/گھنٹہ اور تیاری کے بعد آخری 12 گھنٹے میں 1.4%/گھنٹہ)8۔ ابتدائی مطالعات43 میں NaHS حلوں سے H2S کا مسلسل نقصان پایا گیا، بنیادی طور پر اتار چڑھاؤ اور آکسیڈیشن کی وجہ سے۔ بلبلوں کے اضافے کے بغیر بھی، H2S اتار چڑھاؤ کی وجہ سے اسٹاک محلول میں سلفائیڈ تیزی سے ختم ہو جاتی ہے۔ مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ کم ہونے کے عمل کے دوران، جس میں تقریباً 30-60 سیکنڈ لگتے ہیں، تقریباً 5-10% H2S بخارات کی وجہ سے ضائع ہو جاتا ہے۔ حل سے H2S کے بخارات کو روکنے کے لیے، محققین نے کئی اقدامات کیے ہیں، جن میں محلول12 کو ہلکا ہلکا کرنا، سٹاک محلول کو پلاسٹک کی فلم6 سے ڈھانپنا، اور ہوا میں محلول کی نمائش کو کم سے کم کرنا، کیونکہ H2S بخارات کی شرح کا انحصار ہوا کے مائع انٹرفیس پر ہوتا ہے۔ جو کہ پانی میں نجاست ہیں۔ 13 H2S کے آکسیڈیشن کے نتیجے میں پولی سلفائیڈز بنتے ہیں (سلفر ایٹم جو کوونلنٹ بانڈز سے منسلک ہوتے ہیں)11۔ اس کے آکسیڈیشن سے بچنے کے لیے، H2S پر مشتمل محلول ڈی آکسیجنیٹڈ سالوینٹس 44,45 میں تیار کیے جاتے ہیں اور پھر ڈی آکسیجنیشن کو یقینی بنانے کے لیے 20-30 منٹ کے لیے آرگن یا نائٹروجن سے صاف کیا جاتا ہے۔ ایروبک حل DTPA کی غیر موجودگی میں، 25°C37,47 پر HS- کی آٹو آکسیڈیشن کی شرح تقریباً 3 گھنٹے سے زیادہ تقریباً 50% ہے۔ مزید برآں، چونکہ 1e-سلفائیڈ کا آکسیکرن الٹرا وایلیٹ لائٹ کے ذریعے اتپریرک ہوتا ہے، اس لیے محلول کو برف پر ذخیرہ کیا جانا چاہیے اور روشنی سے محفوظ رکھا جانا چاہیے۔
جیسا کہ شکل 5 میں دکھایا گیا ہے، NaHS پانی میں تحلیل ہونے پر Na+ اور HS-6 میں منقسم ہو جاتا ہے۔ اس انحراف کا تعین ردعمل کے pK1 سے ہوتا ہے، جو درجہ حرارت پر منحصر ہے: pK1 = 3.122 + 1132/T، جہاں T کی حد 5 سے 30°C ہے اور اسے ڈگری کیلون (K)، K = °C + 273.1548 میں ماپا جاتا ہے۔ HS- میں اعلی pK2 (pK2 = 19) ہے، لہذا pH <96.49 پر، S2- نہیں بنتا یا بہت کم مقدار میں بنتا ہے۔ اس کے برعکس، HS- ایک بنیاد کے طور پر کام کرتا ہے اور H2O مالیکیول سے H+ کو قبول کرتا ہے، اور H2O ایک تیزاب کے طور پر کام کرتا ہے اور H2S اور OH- میں تبدیل ہو جاتا ہے۔
NaHS محلول (30 µM) میں تحلیل شدہ H2S گیس کی تشکیل۔ aq، آبی محلول؛ جی، گیس؛ ایل، مائع۔ تمام حسابات فرض کرتے ہیں کہ پانی کا پی ایچ = 7.0 اور پانی کا درجہ حرارت = 20 °C۔ BioRender.com کے ساتھ تخلیق کیا گیا۔
اس بات کے ثبوت کے باوجود کہ NaHS حل غیر مستحکم ہیں، متعدد جانوروں کے مطالعے نے پینے کے پانی میں NaHS حل کو H2S ڈونر کمپاؤنڈ کے طور پر استعمال کیا ہے 15,16,17,18,19,20,21,22,23,24,25,26 مداخلت کے دورانیے کے ساتھ 1 سے 21 ہفتوں تک (ٹیبل 2)۔ ان مطالعات کے دوران، NaHS حل کی تجدید ہر 12 گھنٹے، 15، 17، 18، 24، 25 گھنٹے یا 24 گھنٹے، 19، 20، 21، 22، 23 گھنٹے پر کی جاتی تھی۔ ہمارے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ NaHS حل سے H2S کے نقصان کی وجہ سے چوہوں کو منشیات کی غیر مستحکم ارتکاز کا سامنا کرنا پڑا، اور چوہوں کے پینے کے پانی میں NaHS کا مواد 12 یا 24 گھنٹے سے زیادہ نمایاں طور پر اتار چڑھاؤ آیا (شکل 2 دیکھیں)۔ ان میں سے دو مطالعات میں بتایا گیا ہے کہ پانی میں H2S کی سطح 24 h22 سے زیادہ مستحکم رہی یا یہ کہ 12 h15 میں صرف 2–3% H2S نقصانات دیکھے گئے، لیکن انہوں نے معاون ڈیٹا یا پیمائش کی تفصیلات فراہم نہیں کیں۔ دو مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ پانی کی بوتلوں کا چھوٹا قطر H2S بخارات کو کم سے کم کر سکتا ہے 15,19۔ تاہم، ہمارے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ اس سے پانی کی بوتل سے H2S کے نقصان میں 12–24 گھنٹے کی بجائے صرف 2 گھنٹے تاخیر ہو سکتی ہے۔ دونوں مطالعات نوٹ کرتے ہیں کہ ہم فرض کرتے ہیں کہ پینے کے پانی میں NaHS کی سطح تبدیل نہیں ہوئی کیونکہ ہم نے پانی میں رنگ کی تبدیلی کا مشاہدہ نہیں کیا۔ لہذا، ہوا کے ذریعہ H2S کا آکسیکرن 19,20 اہم نہیں تھا۔ حیرت کی بات یہ ہے کہ یہ موضوعی طریقہ وقت کے ساتھ ساتھ اس کی حراستی میں تبدیلی کی پیمائش کرنے کے بجائے پانی میں NaHS کے استحکام کا اندازہ لگاتا ہے۔
NaHS محلول میں H2S کا نقصان پی ایچ اور درجہ حرارت سے متعلق ہے۔ جیسا کہ ہمارے مطالعے میں بتایا گیا ہے، پانی میں NaHS کو تحلیل کرنے سے الکلائن محلول50 بنتا ہے۔ جب NaHS کو پانی میں تحلیل کیا جاتا ہے، تو تحلیل شدہ H2S گیس کی تشکیل pH قدر 6 پر منحصر ہوتی ہے۔ محلول کا پی ایچ جتنا کم ہوگا، H2S گیس کے مالیکیولز کے طور پر موجود NaHS کا تناسب اتنا ہی زیادہ ہوگا اور پانی کے محلول سے زیادہ سلفائیڈ ضائع ہو جائے گی۔ ان میں سے کسی بھی مطالعہ نے پینے کے پانی کے پی ایچ کی اطلاع نہیں دی ہے جو NaHS کے لیے سالوینٹ کے طور پر استعمال ہوتا ہے۔ ڈبلیو ایچ او کی سفارشات کے مطابق، جنہیں زیادہ تر ممالک اپناتے ہیں، پینے کے پانی کا پی ایچ 6.5–8.551 کی حد میں ہونا چاہیے۔ اس پی ایچ رینج میں، H2S کے اچانک آکسیکرن کی شرح تقریباً دس گنا بڑھ جاتی ہے۔ اس پی ایچ رینج میں پانی میں NaHS کو تحلیل کرنے کے نتیجے میں 1 سے 22.5 μM کی تحلیل شدہ H2S گیس کا ارتکاز ہوگا، جو NaHS کو تحلیل کرنے سے پہلے پانی کے pH کی نگرانی کی اہمیت پر زور دیتا ہے۔ اس کے علاوہ، مندرجہ بالا مطالعہ میں درج درجہ حرارت کی حد (18–26 °C) کے نتیجے میں تحلیل شدہ H2S گیس کے محلول میں تقریباً 10% کے ارتکاز میں تبدیلی آئے گی، کیونکہ درجہ حرارت کی تبدیلیاں pK1 کو بدل دیتی ہیں، اور pK1 میں چھوٹی تبدیلیاں تحلیل شدہ H2S گیس48 کے ارتکاز پر نمایاں اثر ڈال سکتی ہیں۔ اس کے علاوہ، کچھ مطالعات کی طویل مدت (5 ماہ) 22، جس کے دوران درجہ حرارت میں بڑے تغیر کی توقع کی جاتی ہے، بھی اس مسئلے کو بڑھاتا ہے۔
One21 کے علاوہ تمام مطالعات میں پینے کے پانی میں 30 μM NaHS محلول استعمال کیا گیا۔ استعمال شدہ خوراک (یعنی 30 μM) کی وضاحت کرنے کے لیے، کچھ مصنفین نے نشاندہی کی کہ پانی کے مرحلے میں NaHS بالکل H2S گیس کا ارتکاز پیدا کرتا ہے اور H2S کی جسمانی رینج 10 سے 100 μM ہے، اس لیے یہ خوراک جسمانی رینج 15,16 کے اندر ہے۔ دوسروں نے وضاحت کی کہ 30 μM NaHS پلازما H2S کی سطح کو جسمانی رینج کے اندر برقرار رکھ سکتا ہے، یعنی 5–300 μM19,20۔ ہم 30 μM (pH = 7.0، T = 20 ° C) کے پانی میں NaHS کی حراستی پر غور کرتے ہیں، جو H2S کے اثرات کا مطالعہ کرنے کے لیے کچھ مطالعات میں استعمال کیا گیا تھا۔ ہم حساب لگا سکتے ہیں کہ تحلیل شدہ H2S گیس کا ارتکاز 14.7 μM ہے، جو کہ ابتدائی NaHS ارتکاز کا تقریباً 50% ہے۔ یہ قدر اس قدر سے ملتی جلتی ہے جس کا حساب دوسرے مصنفین نے انہی شرائط کے تحت کیا ہے13,48۔
ہمارے مطالعے میں، NaHS انتظامیہ نے جسمانی وزن میں کوئی تبدیلی نہیں کی۔ یہ نتیجہ نر چوہوں 22,23 اور نر چوہوں18 میں دیگر مطالعات کے نتائج سے مطابقت رکھتا ہے۔ تاہم، دو مطالعات میں بتایا گیا ہے کہ NaSH نے نیفریکٹومائزڈ چوہوں میں جسمانی وزن میں کمی کو بحال کیا 24,26، جبکہ دیگر مطالعات نے جسم کے وزن 15,16,17,19,20,21,25 پر NaSH انتظامیہ کے اثر کی اطلاع نہیں دی۔ مزید برآں، ہمارے مطالعے میں، NaSH انتظامیہ نے سیرم یوریا اور کریٹائن کرومیم کی سطح کو متاثر نہیں کیا، جو کہ ایک اور رپورٹ25 کے نتائج کے مطابق ہے۔
تحقیق سے پتا چلا کہ 2 ہفتوں تک پینے کے پانی میں NaHS کا اضافہ نر اور مادہ چوہوں میں سیرم سلفائیڈ کی کل تعداد کو متاثر نہیں کرتا۔ یہ تلاش سین ایٹ ال کے نتائج سے مطابقت رکھتی ہے۔ (16): پینے کے پانی میں 30 μM NaHS کے ساتھ 8 ہفتوں کے علاج نے کنٹرول چوہوں میں پلازما سلفائیڈ کی سطح کو متاثر نہیں کیا۔ تاہم، انہوں نے اطلاع دی کہ اس مداخلت نے نیفریکٹومائزڈ چوہوں کے پلازما میں H2S کی کمی کو بحال کیا۔ لی وغیرہ۔ (22) نے یہ بھی بتایا کہ 5 ماہ تک پینے کے پانی میں 30 μM NaHS کے ساتھ علاج کرنے سے بوڑھے چوہوں میں پلازما فری سلفائیڈ کی سطح میں تقریباً 26 فیصد اضافہ ہوا۔ دیگر مطالعات میں پینے کے پانی میں NaHS کے اضافے کے بعد گردش کرنے والے سلفائیڈ میں تبدیلی کی اطلاع نہیں ملی ہے۔
سات مطالعات نے سگما NaHS15,16,19,20,21,22,23 کے استعمال کی اطلاع دی لیکن ہائیڈریشن کے پانی کے بارے میں مزید تفصیلات فراہم نہیں کیں، اور پانچ مطالعات میں ان کی تیاری کے طریقوں میں استعمال ہونے والے NaHS کے ماخذ کا ذکر نہیں کیا گیا 17,18,24,25,26۔ NaHS ایک ہائیڈریٹڈ مالیکیول ہے اور اس کے پانی میں ہائیڈریشن مواد مختلف ہو سکتا ہے، جو کہ دی گئی مولیریٹی کا حل تیار کرنے کے لیے درکار NaHS کی مقدار کو متاثر کرتا ہے۔ مثال کے طور پر، ہمارے مطالعے میں NaHS کا مواد NaHS•1.3 H2O تھا۔ اس طرح، ان مطالعات میں اصل NaHS ارتکاز ان رپورٹوں سے کم ہو سکتا ہے۔
"اس طرح کے قلیل المدت مرکب کا اتنا دیرپا اثر کیسے ہو سکتا ہے؟" Pozgay et al.21 نے چوہوں میں کولائٹس پر NaHS کے اثرات کا جائزہ لیتے وقت یہ سوال پوچھا۔ وہ امید کرتے ہیں کہ مستقبل کے مطالعے اس سوال کا جواب دینے کے قابل ہوں گے اور قیاس کریں گے کہ NaHS حل میں H2S اور ڈسلفائڈز کے علاوہ زیادہ مستحکم پولی سلفائیڈز شامل ہو سکتے ہیں جو NaHS21 کے اثر میں ثالثی کرتے ہیں۔ ایک اور امکان یہ ہے کہ حل میں باقی رہ جانے والی NaHS کی بہت کم ارتکاز کا بھی فائدہ مند اثر ہو سکتا ہے۔ درحقیقت، اولسن وغیرہ۔ اس بات کا ثبوت فراہم کیا کہ خون میں H2S کی مائیکرومولر لیول جسمانی نہیں ہیں اور نینومولر رینج میں ہونی چاہئیں یا مکمل طور پر غائب ہونی چاہئیں۔ H2S پروٹین سلفیشن کے ذریعے کام کر سکتا ہے، ایک الٹ جانے والی ترجمہ کے بعد کی تبدیلی جو بہت سے پروٹینز کے افعال، استحکام اور لوکلائزیشن کو متاثر کرتی ہے52,53,54۔ درحقیقت، جسمانی حالات میں، تقریباً 10% سے 25% جگر کے بہت سے پروٹین سلفائلیٹڈ ہوتے ہیں53۔ دونوں مطالعات NaHS19,23 کی تیزی سے تباہی کو تسلیم کرتے ہیں لیکن حیرت انگیز طور پر یہ بتاتے ہیں کہ "ہم نے پینے کے پانی میں NaHS کے ارتکاز کو روزانہ تبدیل کرکے کنٹرول کیا۔" 23 ایک تحقیق نے اتفاقی طور پر کہا کہ "NaHS ایک معیاری H2S ڈونر ہے اور عام طور پر H2S کو تبدیل کرنے کے لیے کلینیکل پریکٹس میں استعمال ہوتا ہے۔"
مندرجہ بالا بحث سے پتہ چلتا ہے کہ NaHS اتار چڑھاؤ، آکسیڈیشن اور فوٹولائسز کے ذریعے حل سے محروم ہو گیا ہے، اور اس لیے حل سے H2S کے نقصان کو کم کرنے کے لیے کچھ تجاویز دی گئی ہیں۔ سب سے پہلے، H2S کا بخارات گیس مائع انٹرفیس13 اور محلول11 کے pH پر منحصر ہے۔ اس لیے، بخارات سے ہونے والے نقصان کو کم کرنے کے لیے، پانی کی بوتل کی گردن کو جتنا ممکن ہو چھوٹا بنایا جا سکتا ہے جیسا کہ پہلے بیان کیا گیا ہے 15,19، اور پانی کی پی ایچ کو ایک قابل قبول اوپری حد (یعنی، 6.5–8.551) میں ایڈجسٹ کیا جا سکتا ہے تاکہ بخارات کے نقصان کو کم کیا جا سکے۔ دوسرا، H2S کا خود بخود آکسیجن آکسیجن کے اثرات اور پینے کے پانی میں ٹرانزیشن میٹل آئنوں کی موجودگی کی وجہ سے ہوتا ہے، لہذا آرگن یا نائٹروجن44,45 کے ساتھ پینے کے پانی کی ڈی آکسیجنیشن اور میٹل چیلیٹرس37,47 کا استعمال سلفائیڈز کے آکسیکرن کو کم کر سکتا ہے۔ تیسرا، H2S کے فوٹو ڈیکمپوزیشن کو روکنے کے لیے، پانی کی بوتلوں کو ایلومینیم فوائل سے لپیٹا جا سکتا ہے۔ یہ مشق روشنی سے متعلق حساس مواد جیسے کہ streptozotocin55 پر بھی لاگو ہوتی ہے۔ آخر میں، غیر نامیاتی سلفائیڈ نمکیات (NaHS، Na2S، اور CaS) کو پینے کے پانی میں تحلیل کرنے کی بجائے گیویج کے ذریعے دیا جا سکتا ہے جیسا کہ پہلے بتایا گیا ہے 56,57,58؛ مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ تابکار سوڈیم سلفائیڈ جو چوہوں کو گیویج کے ذریعے دیا جاتا ہے وہ اچھی طرح جذب ہوتا ہے اور تقریباً تمام ٹشوز میں تقسیم ہوتا ہے۔ آج تک، زیادہ تر مطالعات نے غیر نامیاتی سلفائیڈ نمکیات کو انٹراپریٹونی طور پر استعمال کیا ہے۔ تاہم، یہ راستہ کلینیکل سیٹنگز60 میں شاذ و نادر ہی استعمال ہوتا ہے۔ دوسری طرف، زبانی راستہ انسانوں میں انتظامیہ کا سب سے عام اور ترجیحی راستہ ہے۔ لہذا، ہم زبانی گیجج کے ذریعہ چوہوں میں H2S عطیہ دہندگان کے اثرات کا جائزہ لینے کی تجویز کرتے ہیں۔
ایک حد یہ ہے کہ ہم نے MB طریقہ استعمال کرتے ہوئے پانی کے محلول اور سیرم میں سلفائیڈ کی پیمائش کی۔ سلفائیڈ کی پیمائش کرنے کے طریقوں میں آئوڈین ٹائٹریشن، سپیکٹرو فوٹومیٹری، الیکٹرو کیمیکل طریقہ (پوٹینٹیومیٹری، ایمپرومیٹری، کولومیٹرک طریقہ اور ایمپرومیٹرک طریقہ) اور کرومیٹوگرافی (گیس کرومیٹریگرافی اور ہائی پرفارمنس مائع کرومیٹوگرافی) شامل ہیں، جن میں سے سب سے زیادہ استعمال ہونے والا طریقہ MB26 اسپیکٹو میٹرک طریقہ ہے۔ حیاتیاتی نمونوں میں H2S کی پیمائش کے لیے MB طریقہ کار کی ایک حد یہ ہے کہ یہ تمام سلفر پر مشتمل مرکبات کی پیمائش کرتا ہے نہ کہ H2S63 سے پاک کیونکہ یہ تیزابی حالات میں انجام پاتا ہے، جس کے نتیجے میں حیاتیاتی ماخذ64 سے سلفر کا اخراج ہوتا ہے۔ تاہم، امریکن پبلک ہیلتھ ایسوسی ایشن کے مطابق، MB پانی میں سلفائیڈ کی پیمائش کا معیاری طریقہ ہے65۔ لہذا، یہ حد NaHS پر مشتمل حل کے عدم استحکام پر ہمارے اہم نتائج کو متاثر نہیں کرتی ہے۔ مزید برآں، ہمارے مطالعے میں، NaHS پر مشتمل پانی اور سیرم کے نمونوں میں سلفائیڈ کی پیمائش کی بازیابی بالترتیب 91% اور 93% تھی۔ یہ قدریں پہلے کی اطلاع کردہ حدود (77–92)66 کے مطابق ہیں، جو قابل قبول تجزیاتی درستگی کی نشاندہی کرتی ہیں42۔ یہ بات قابل غور ہے کہ ہم نے نر اور مادہ دونوں چوہوں کا استعمال نیشنل انسٹی ٹیوٹ آف ہیلتھ (NIH) کے رہنما خطوط کے مطابق کیا تاکہ طبی مطالعات میں صرف نر جانوروں کے مطالعے پر زیادہ انحصار سے بچا جا سکے اور جب بھی ممکن ہو نر اور مادہ دونوں چوہوں کو شامل کیا جا سکے۔ اس نکتے پر دوسروں نے زور دیا ہے 69,70,71۔
آخر میں، اس تحقیق کے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ پینے کے پانی سے تیار کردہ NaHS حل ان کی عدم استحکام کی وجہ سے H2S پیدا کرنے کے لیے استعمال نہیں کیے جا سکتے۔ انتظامیہ کا یہ راستہ جانوروں کو غیر مستحکم اور NaHS کی متوقع سطح سے کم پر لے جائے گا۔ لہذا، نتائج انسانوں پر لاگو نہیں ہوسکتے ہیں.
موجودہ مطالعہ کے دوران استعمال کیے گئے اور/یا تجزیہ کیے گئے ڈیٹاسیٹس مناسب درخواست پر متعلقہ مصنف سے دستیاب ہیں۔
Szabo, K. ہائیڈروجن سلفائیڈ (H2S) تحقیق کی ٹائم لائن: ماحولیاتی ٹاکسن سے حیاتیاتی ثالث تک۔ بایو کیمسٹری اور فارماکولوجی 149، 5-19۔ https://doi.org/10.1016/j.bcp.2017.09.010 (2018)۔
Abe, K. اور Kimura, H. ایک endogenous neuromodulator کے طور پر ہائیڈروجن سلفائیڈ کا ممکنہ کردار۔ جرنل آف نیورو سائنس، 16، 1066–1071۔ https://doi.org/10.1523/JNEUROSCI.16-03-01066.1996 (1996)۔
Chirino, G., Szabo, C. اور Papapetropoulos, A. ممالیہ کے خلیوں، ؤتکوں اور اعضاء میں ہائیڈروجن سلفائیڈ کا جسمانی کردار۔ فزیالوجی اور مالیکیولر بائیولوجی میں جائزے 103، 31-276۔ https://doi.org/10.1152/physrev.00028.2021 (2023)۔
Dillon, KM, Carrazzone, RJ, Matson, JB, and Kashfi, K. نائٹرک آکسائیڈ اور ہائیڈروجن سلفائیڈ کے لیے سیلولر ڈیلیوری سسٹم کا ارتقائی وعدہ: ذاتی ادویات کا ایک نیا دور۔ بایو کیمسٹری اور فارماکولوجی 176، 113931۔ https://doi.org/10.1016/j.bcp.2020.113931 (2020)۔
سن، ایکس، وغیرہ۔ سست ریلیز ہائیڈروجن سلفائیڈ ڈونر کی طویل مدتی انتظامیہ مایوکارڈیل اسکیمیا/ریپرفیوژن چوٹ کو روک سکتی ہے۔ سائنسی رپورٹس 7، 3541۔ https://doi.org/10.1038/s41598-017-03941-0 (2017)۔
Sitdikova, GF, Fuchs, R., Kainz, W., Weiger, TM اور Hermann, A. BK چینل فاسفوریلیشن ہائیڈروجن سلفائیڈ (H2S) کی حساسیت کو منظم کرتا ہے۔ فرنٹیئرز ان فزیالوجی 5، 431۔ https://doi.org/10.3389/fphys.2014.00431 (2014)۔
Sitdikova, GF, Weiger, TM اور Hermann, A. ہائیڈروجن سلفائیڈ چوہے کے پٹیوٹری ٹیومر خلیوں میں کیلشیم سے چلنے والے پوٹاشیم (BK) چینل کی سرگرمی کو بڑھاتا ہے۔ آرکیٹ۔ Pfluegers. 459، 389–397۔ https://doi.org/10.1007/s00424-009-0737-0 (2010)۔
جیڈی، ایس، وغیرہ۔ ہائیڈروجن سلفائیڈ ٹائپ 2 ذیابیطس کے چوہوں میں مایوکارڈیل اسکیمیا-ریپرفیوژن چوٹ کے خلاف نائٹریٹ کے حفاظتی اثر کو بڑھاتا ہے۔ نائٹرک آکسائیڈ 124، 15–23۔ https://doi.org/10.1016/j.niox.2022.04.004 (2022)۔
Corvino، A.، et al. H2S ڈونر کیمسٹری میں رجحانات اور دل کی بیماری پر اس کے اثرات۔ اینٹی آکسیڈنٹس 10، 429۔ https://doi.org/10.3390/antiox10030429 (2021)۔
DeLeon, ER, Stoy, GF, and Olson, KR (2012)۔ حیاتیاتی تجربات میں ہائیڈروجن سلفائیڈ کے غیر فعال نقصانات۔ تجزیاتی بائیو کیمسٹری 421، 203–207۔ https://doi.org/10.1016/j.ab.2011.10.016 (2012)۔
ناگی، پی، وغیرہ۔ جسمانی نمونوں میں ہائیڈروجن سلفائیڈ کی پیمائش کے کیمیائی پہلو۔ Biochimica et Biophysical Acta 1840، 876–891۔ https://doi.org/10.1016/j.bbagen.2013.05.037 (2014)۔
کلائن، ایل ایل ڈی۔ قدرتی پانیوں میں ہائیڈروجن سلفائیڈ کا سپیکٹرو فوٹومیٹرک تعین۔ لِمنول۔ اوشینوگر 14، 454–458۔ https://doi.org/10.4319/lo.1969.14.3.0454 (1969)۔
اولسن، کے آر (2012)۔ ہائیڈروجن سلفائیڈ کی کیمسٹری اور حیاتیات میں عملی تربیت۔ "اینٹی آکسیڈینٹ۔" ریڈوکس سگنلنگ۔ 17، 32–44۔ https://doi.org/10.1089/ars.2011.4401 (2012)۔